تعیین کمیت باکتری مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس در مدفوع گاوهای هلشتاین با استفاده از روش real-time pcr

thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی
author مهدی خیرآبادی
adviser محمدرضا نصیری عباسعلی ناصریان
Number of pages: First 15 pages
publication year 1390

abstract

باکتری مایکوباکتریوم آویوم پاراتوبرکلوزیس به عنوان عامل بیماری یون شناخته می شود و همچنین ممکن است در شیوع بیماری کرون در انسان نقش داشته باشد. خسارات اقتصادی سنگین حاصل از این بیماری، موجب پیشرفت سنجش های سریع، حساس و خاصی برای شناسایی حیوانات آلوده گردیده است، که برای طرح ریزی راهبرد های منطقی در کنترل گسترش پاراتوبرکلوزیس ضروری می باشد. ژنوم این باکتری از حدود 5 میلیون جفت باز در یک کروموزوم حلقوی با بیش از 4500 ژن تشکیل شده است و طول متوسط هر ژن در آن 1015 جفت باز می باشد. ژن های بیماریزای مرتبط با این باکتری شامل hspx، f57 و is900 هستند که ما در این تحقیق از توالی درون جایگیر is900برای شناسایی پاراتوبرکلوزیس استفاده کردیم. هدف از این مطالعه، توسعه ی تکنیک pcr real-time برای تعیین کمیت باکتری پاراتوبرکلوزیس در نمونه های مدفوع گاوی بود. نمونه های مدفوع از 40 گاو موجود در 2 گله ی گاوهای شیری تجاری و در موقعیت های متفاوت ایران جمع آوری شدند. قطعه ی 400 جفت بازی با استفاده از آغازگرهای p90 و p91 مخصوص جایگاه ژنی is900 از طریق واکنش زنجیره ای پلیمراز به منظور تشخیص پاراتوبرکلوزیس در نمونه های مدفوع تکثیر شد. 10 نمونه مدفوع توسط واکنش زنجیره ای پلیمراز مثبت نشان داده شد. قطعه ی 400 جفت بازی تکثیر شده از جایگاه ژنی is900 در داخل ناقل ptz57r/t همسان سازی شد. پلاسمید نوترکیب، استخراج شد و به عنوان dna استاندارد مورد استفاده قرار گرفت. نتایج با استفاده از منحنی استاندارد حاصل از پلاسمید حاوی is900 (98=% (r2 تعیین کمیت شدند. توانایی کمی سازی در این آزمایش در دامنه ی گسترده ی خطی ( 50 تا 5×105 کپی ) برای ارزیابی تعداد کپی های قطعه ی هدف از پاراتوبرکلوزیس در نمونه های مثبت مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان می-دهد که روش real-time pcr می تواند به عنوان روش جایگزین برای تشخیص سریع تر پاراتوبرکلوزیس معرفی شود. کاربرد سودمند این سنجش، توانایی کمیت سنجی دقیق و سریع تعداد سلول های پاراتوبرکلوزیس در نمونه های ناشناخته می باشد.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

بررسی تنوع ژن 3.2 PCR-RFLP در گاوهای هلشتاین ایرانی با استفاده از روش PCR-RFLP

full text

شناسایی مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس در نمونه های مدفوع گاوهای نژاد هلشتاین– فریزین با استفاده از روش های کشت و مولکولی

مایکو باکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس که به اختصار مایکو باکتریوم پاراتوبرکلوزیس نامیده می شود، عامل بیماری یون است. بیماری یون یا پاراتوبرکلوزیس نوعی التهاب روده مزمن و پیشرونده است که حیوانات اهلی و وحشی، و عمدتا نشخوار کنندگان به آن مبتلا می شوند. هدف اصلی این مطالعه شناسایی اشکال تحت بالینی بیماری یون است، که با دو روش کشت و مولکولی روی نمونه های مدفوع گاوهای نژاد هلشتاین فریزین استا...

full text

مطالعه کارآیی روش تشخیصی آزمایش مستقیم میکروبی، PCR900IS و کشت میکروبی در تشخیص باکتری مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس در مدفوع گاوهای به ظاهر سالم

بیماری یون یا پاراتوبرکلوزیس نوعی آنتریت گرانولوماتوزی مزمن در نشخوارکنندگان با عامل مسبب مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس (MAP) میباشد و خسارات اقتصادی فراوانی به صنعت دامپروری به‌خصوص گاوداری شیری در سراسر دنیا وارد میکند. تشخیص MAP در نمونههای بالینی با روش کشت میکروبی به عنوان روش استاندارد طلایی به 16-6 هفته زمان نیاز دارد. از طرف دیگر شناسایی سریع و دقیق گاوهای دفع کنند...

full text

بررسی عیار سرمی آنتی بادی ضد مایکوباکتریوم اویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس به روش الایزا در گاوهای شیری هلشتاین

بررسی عیار سرمی آنتی بادی ضد مایکوباکتریوم اویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس به روش الایزا در گاوهای شیری هلشتاین بیماری یون یا (Johnes Disease) از جمله عفونت های مزمن باکتریایی در نشخوار کنندگان می باشد که با توجه به اسهال شدید و طولانی مدتی که ایجاد می کند، باعث تحلیل رفتن بدن دام می شود. هدف از این تحقیق بررسی عیار سرمی آنتی بادی ضد مایکوباکتریوم اویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس (عامل بیماری یون) به...

full text

شناسایی مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس‌ ‌در نمونه‌های مدفوع گاوهای نژاد هلشتاین– فریزین با استفاده از‌ ‌روش‌های کشت و مولکولی‌

full text

تعیین ژنوتیپ RHD جنین در مادران RhD منفی با استفاده از Real Time PCR

چکیده سابقه و هدف آنتی‌ژن RhD ، نقش مهمی را در ایجاد بیماری همولیتیک جنین و نوزاد ایفا می‌کند. هدف از انجام این مطالعه، تعیین ژنوتیپ RhD جنین در پلاسمای مادران RhD منفی و هم چنین تعیین جنسیت جنین در هفته‌های نخست بارداری با استفاده از روش Real Time PCR بود. مواد و روش‌ها در این مطالعه توصیفی، 21 نمونه DNA ، از پلاسمای مادران باردارRhD منفی که در سنین بارداری بین 8 تا 39 هفته قرار داشتند...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}

document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی

Keywords

مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس، بیماری یون، کمی¬سازی،is900 ، real time pcr.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com